Uso della tecnologia per lo scopo

I metodi di rilevamento del DNA, come la reazione a catena della polimerasi o la PCR, possono non indicare la presenza di proteine allergeniche, quindi un risultato negativo della PCR non garantisce l'assenza di proteine.

Per questo motivo, è preferibile l'uso di metodi di rilevazione di proteine o peptidi, anche se la Direttiva europea 2007/68/CE stabilisce che tutti i derivati degli allergeni alimentari contenuti nel prodotto devono comparire sull'etichetta, senza distinguere tra proteine o altri composti come metaboliti o DNA.

Tecnologie consigliate per applicazioni tipiche: trattandosi di una tecnica quantitativa, l'analisi Elisa (enzyme-linked immunosorbent assay) è consigliata per la verifica dei processi di pulizia o per l'analisi di componenti o prodotti finiti.

I dispositivi a flusso laterale o LFD possono essere utilizzati in loco per i controlli di routine della pulizia, ma dovrebbero essere confermati regolarmente dall'analisi ELISA.

Se il risultato del metodo basato sulle proteine è ambiguo, il risultato ottenuto dal test PCR può essere utilizzato come conferma ausiliaria. Tuttavia, data la sensibilità del test PCR ad alcuni allergeni, questo sarebbe accettabile quando il risultato ELISA è superiore a 10-20 mg/kg (ppm).

L'uso del test PCR è raccomandato solo quando non sono disponibili altre tecnologie di rilevazione delle proteine, come ad esempio per la rilevazione di frutta a guscio diversa da noci, nocciole o mandorle o per la rilevazione del sedano.

I test LFD devono essere utilizzati in loco, per le ispezioni di routine di verifica della pulizia o per i test finalizzati al lancio di un prodotto finito.

La metodologia della spettrometria di massa (MS) non è una tecnica convenzionale e deve essere utilizzata se i risultati ottenuti con i metodi convenzionali sono divergenti ed è necessario un secondo test di conferma.

Metodi basati sulla rilevazione delle proteine:

• Le proteine sono l'obiettivo principale della rilevazione, poiché la maggior parte degli allergeni alimentari elencati nell'appendice iii della direttiva 2007/68/CE sono proteine, ad eccezione del solfito e dell'anidride solforosa.

I metodi basati sulla rilevazione delle proteine possono essere suddivisi in due categorie.

Metodi immunologici:

• Questo tipo di metodo si basa sugli anticorpi. Per rilevare le proteine si utilizza un anticorpo simile a quello che provoca la reazione allergica nell'uomo.

• I metodi tipici sono il saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) e i dispositivi a flusso laterale (LFD) noti come strisce reattive.

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